原核表达系统

优点：

手段成熟、应用广泛、成本低

繁殖快，表达量高、缩短实验时间

抗污染能力强

表达产物分离纯化相对简单、稳定性好

遗传背景清晰

昆虫表达系统

优点：

基因容量大，外源基因表达效率高

糖基化和广泛的翻译后修饰

重组病毒易于筛选

可折叠部分蛋白

无内毒素

哺乳动物细胞表达系统

优点：

较高的表达水平

准确的蛋白折叠和翻译后修饰

可表达分泌蛋白

悬浮培养特性允许大规模生产

无内毒素

酵母表达系统

优点：

周期短、成本低、效率高

具备了广泛性的对蛋白的加工、翻译后修饰能力

可用来表达分泌蛋白

无内毒素

高压低温匀浆破碎

收获细胞后，通过液体剪切作用来大规模破碎细胞，收获细胞物质以用于后续纯化。

凝胶过滤层析

又称为排阻层析或分子筛。根据被分离样品中各组分相对分子质量大小的差异进行洗脱分离。操作条件比较温和不需要有机溶剂。

亲和层析

通过生物分子之间的特异性相互作用实现蛋白分离纯化，亲和吸附剂上的配基有选择地吸附能与其结合的物质。具有高选择性、高纯度、快速等特点，通常在重组蛋白的分离中作为第一步的粗提纯，对大部分杂质蛋白进行去除。

离子交换层析

不同蛋白具有不同的等电点，当其在不同pH缓冲液条件下时所带的电荷不同，可根据蛋白带电性质选择不同的离子交换柱。过程可逆、操控性强，在精纯步骤中常与其他方法结合使用。

疏水作用层析

根据生物分子疏水性质实现纯化的一种层析方法，在高离子强度下，增进蛋白质与层析介质间疏水作用力，实现吸附；在降低流动相离子强度时，蛋白质分子与层析介质疏水作用削弱，目的蛋白即可洗脱和收集。